1+1>2?  在MAPK抑制劑聯(lián)合使用前引入抗pd -1/L1可最大限度地提高抗腫瘤免疫和療效

研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)PD-1/PD-L1和MAPK靶向療法已經(jīng)徹底改變了BRAFV600MUT黑色素瘤的治療。同時(shí)，以往有研究表明，作為單獨(dú)使用的藥物，PD-1抑制劑nivolumab和pembrolizumab已證明其可以改善5年生存率。nivolumab與CTLA-4抑制劑ipilimumab聯(lián)用也可以改善黑色素瘤患者的緩解狀態(tài)。當(dāng)免疫檢查點(diǎn)抑制劑抗PD-1/L1和抗CTLA-4聯(lián)合使用時(shí)，可將先天耐藥率由60%-70%降至40%-50%，分享的這篇cell子刊文章針對(duì)BRAFV600MUT黑色素瘤患者的絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)靶向療法，以及MAPK抑制劑結(jié)合免疫檢查點(diǎn)抑制劑抗PD-1/L1的聯(lián)合使用做了相關(guān)的實(shí)驗(yàn)，對(duì)臨床的治療具有重要的指導(dǎo)意義。

免疫檢查點(diǎn)：是一類免疫抑制性的分子，可以調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的強(qiáng)度和廣度，從而避免正常組織的損傷和破壞，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中，免疫檢查點(diǎn)成為免疫耐受的主要原因之一。免疫檢查點(diǎn)療法就是通過(guò)共抑制或共刺激信號(hào)等一系列途徑以調(diào)節(jié)T細(xì)胞活性來(lái)殺傷腫瘤細(xì)胞的治療方法。

免疫檢查點(diǎn)抑制劑：因此引出了針對(duì)相應(yīng)的免疫檢查點(diǎn)研發(fā)的一些單抗類藥物如抗PD-1/L1，其主要作用為阻斷表達(dá)免疫檢查點(diǎn)的腫瘤細(xì)胞與免疫細(xì)胞之間的作用，從而阻斷腫瘤細(xì)胞對(duì)免疫細(xì)胞的抑制作用。

 文章背景：

在BRAFV600MUT黑色素瘤患者中同時(shí)啟動(dòng)抗pd -1/L1和BRAFi + MEKi治療(也稱為三聯(lián)療法)已在臨床試驗(yàn)中進(jìn)行測(cè)試，并被假設(shè)這種方式可以降低先天抗pd -1/L1抗性和獲得性MAPKi抗性。之前臨床數(shù)據(jù)分析表明，MAPKi的進(jìn)展與后續(xù)抗pd -1治療的不良反應(yīng)有關(guān)。是否先用免疫檢查點(diǎn)療法治療，直到病情進(jìn)展改變隨后的MAPKi反應(yīng)性仍不清楚。

展望未來(lái)，MAPKi和免疫檢查點(diǎn)療法的最佳排序正在多個(gè)臨床試驗(yàn)中進(jìn)行測(cè)試。這些試驗(yàn)測(cè)試對(duì)疾病率先使用一種治療方式，直到疾病發(fā)生進(jìn)展，然后再轉(zhuǎn)向另一種治療方式。然而，治療直至進(jìn)展可能會(huì)引起交叉耐藥性。到目前為止，在轉(zhuǎn)換到另一種療法或與另一種療法結(jié)合之前，短時(shí)間接觸一種療法(以產(chǎn)生啟動(dòng)效應(yīng))的影響尚未得到評(píng)估。這種順序組合可能會(huì)避免交叉耐藥性的發(fā)展，通過(guò)疊加多種治療機(jī)制提高耐藥性進(jìn)化的閾值，并允許一種治療模式對(duì)另一種模式的主要響應(yīng)，從而產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)。重要的是，此前的研究表明，抗腫瘤免疫在延長(zhǎng)臨床和臨床前MAPKi應(yīng)答的持久性方面發(fā)揮了作用。

 文章亮點(diǎn)：

1.免疫檢查點(diǎn)療法使得MAPKi治療的黑色素瘤患者具有更長(zhǎng)的無(wú)進(jìn)展生存期。

2.聯(lián)合用藥得過(guò)程中抗pd -1/L1延長(zhǎng)了腫瘤消退的持久性。

3.靶向M2-TAMs可減緩CD8+ T細(xì)胞得消除。

4.免疫檢查點(diǎn)抑制劑抗PD-1/L1和抗CTLA-4的聯(lián)合使用可能進(jìn)一步控制黑色素瘤腦轉(zhuǎn)移。

既往研究發(fā)現(xiàn)免疫檢查點(diǎn)療法可增強(qiáng)黑色素瘤患者的MAPKi反應(yīng)

BRAFV600MUT黑色素瘤患者接受達(dá)拉非尼+ 曲美替尼治療，并根據(jù)既往免疫檢查點(diǎn)療法暴露情況進(jìn)行區(qū)分的無(wú)進(jìn)展生存分析

在單因素研究中，既往有免疫檢查點(diǎn)療法的患者無(wú)進(jìn)展生存期更長(zhǎng) 。在單變量中，既往免疫檢查點(diǎn)療法的總生存期(OS)無(wú)顯著差異或多變量分析。沒(méi)有證據(jù)表明治療組的結(jié)果存在異質(zhì)性。其他研究中，2期隨機(jī)臨床試驗(yàn)S1320于2013年至2019年期間對(duì)BRAFV600E/KF轉(zhuǎn)移性黑色素瘤患者進(jìn)行隨機(jī)分組，以比較BRAFi達(dá)拉非尼和MAPKi曲美替尼的間歇（n=101）和連續(xù)（n=105）給藥的治療療效，同時(shí)以給藥前先進(jìn)行免疫檢查點(diǎn)療法為試驗(yàn)的一個(gè)隨機(jī)分層因素。結(jié)果顯示持續(xù)給藥比間歇給藥患者的無(wú)進(jìn)展生存期（PFS）更長(zhǎng)，在單變量中，給藥前先進(jìn)行免疫檢查點(diǎn)療法的患者的無(wú)進(jìn)展生存期（PFS）更長(zhǎng)。該試驗(yàn)表明率先進(jìn)行免疫檢查點(diǎn)療法可增強(qiáng)黑色素瘤患者對(duì)MAPKi的反應(yīng)。

引入Anti-PD-1/L1并與MAPKi組合排序以優(yōu)化抗腫瘤療效

研究人員造模過(guò)程中使用了BrafV600、Nras或Nf1突變驅(qū)動(dòng)的黑色素瘤、KrasG12C驅(qū)動(dòng)的結(jié)直腸癌腫瘤和胰腺癌腫瘤，首先每周加入兩次抗PD-1（抗PD-L1）進(jìn)行預(yù)處理，查看是否可以改善MEKi的后續(xù)反應(yīng)。接下來(lái)對(duì)腫瘤小鼠在以下控制(不積極治療,單藥治療,或同時(shí)聯(lián)合治療)結(jié)果發(fā)現(xiàn)引入抗PD-L1后，聯(lián)合MEKi可以產(chǎn)生巨大的抗腫瘤活性，在抗pd - l1與MEKi聯(lián)合之前，簡(jiǎn)單給藥抗pd - l1可以克服抗pd - l1固有耐藥并延遲獲得MEKi耐藥BRAFi + MEKi抗pd - l1治療。對(duì)于后一組(從第7天開(kāi)始)，我們測(cè)試了抗pd - l1導(dǎo)入的影響(兩次劑量)。與之前單獨(dú)使用MEKi的數(shù)據(jù)一致(圖2B)，抗pd - l1引入后，BRAFi + MEKi聯(lián)合用藥持續(xù)產(chǎn)生了最持久的抗腫瘤活性(圖2I)，與其他同期方案相比，小鼠體重下降了10%。

排序組合治療后，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)（CyTOF，immune cytometry by time-of-flight）分析聯(lián)合治療前引入抗PD-L1特異性引起的免疫微環(huán)境的改變

從上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果研究人員得出MEKi聯(lián)合治療前抗pd - l1引入方案會(huì)特異性誘導(dǎo)免疫細(xì)胞,所以研究人員對(duì)三種腫瘤模型采用質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)（CyTOF，immune cytometry by time-of-flight）進(jìn)行分析，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)是利用質(zhì)譜原理對(duì)單細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù)檢測(cè)的流式技術(shù)。它繼承了傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀的高速分析的特點(diǎn)，又具有質(zhì)譜檢測(cè)的高分辨能力，是流式細(xì)胞技術(shù)一個(gè)新的發(fā)展方向。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，三種腫瘤模型的CD45+細(xì)胞浸潤(rùn)水平高度不同，但在所有CD45+細(xì)胞中，腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞都是三種腫瘤中最豐富的亞群。接下來(lái)，研究人員使用耦合的scRNA-和scTCR-seq分析T細(xì)胞群體(13803個(gè)細(xì)胞)。通過(guò)亞聚類，鑒定出9個(gè)T細(xì)胞亞群。還發(fā)現(xiàn)抗pd -1/L1導(dǎo)入前的MEKi聯(lián)合使用通過(guò)促進(jìn)巨噬細(xì)胞的促炎極化和干擾素- hi的克隆擴(kuò)增，以及高表達(dá)激活基因的CD8+細(xì)胞毒性和增殖(相對(duì)于CD4+調(diào)節(jié)性)T細(xì)胞，優(yōu)化了反應(yīng)的持久性。

測(cè)試上述順序的聯(lián)合用藥方案對(duì)多器官轉(zhuǎn)移的影響，并觀察T細(xì)胞克隆擴(kuò)增抗pd -1/L1引物后的MAPKi反應(yīng)

由于黑色素瘤腦轉(zhuǎn)移（MBM）對(duì)治療的反應(yīng)可能較差，研究人員還測(cè)試了測(cè)序組合方案在多個(gè)器官部位的抗腫瘤作用。結(jié)果顯示結(jié)果顯示在與MEKi聯(lián)合使用之前，兩劑量的抗PD-L1可以克服MBM中先天性抗PD-L1耐藥性和獲得性MEKi耐藥性，而聯(lián)合抗CTLA-4的免疫檢查點(diǎn)療法可以進(jìn)一步促進(jìn)抗PD-L1的啟動(dòng)作用，提高順序聯(lián)合方案的抗腫瘤活性和生存率。進(jìn)一步通過(guò)TCR-seq跟蹤分析瘤內(nèi)（卵巢和腦腫瘤）T細(xì)胞克隆類型發(fā)現(xiàn)，由兩劑抗PD-L1伴隨MEKi聯(lián)合的方案在每個(gè)器官的不同腫瘤累及區(qū)域之間以及顱內(nèi)和顱外器官之間誘導(dǎo)了最強(qiáng)大的T細(xì)胞克隆擴(kuò)增和克隆型融合，從而抑制了MBM，改善了小鼠存活率。

文章小結(jié)：

到這里這篇文章的主要內(nèi)容就介紹完了，這篇文章的研究不同于傳統(tǒng)的聯(lián)合用藥方式，傳統(tǒng)聯(lián)合療法通常是一起開(kāi)始的。在這里，是在開(kāi)始前加入兩次抗PD-1（抗PD-L1）進(jìn)行預(yù)處理，研究人員通過(guò)這種方法避免了交叉耐藥性的發(fā)展，通過(guò)多種治療方式的疊加提高耐藥性演變的閾值，結(jié)合了耐藥性，腫瘤免疫微環(huán)境，免疫檢查點(diǎn)抑制劑，免疫檢查點(diǎn)療法等腫瘤領(lǐng)域研究熱點(diǎn)做了充分的實(shí)驗(yàn)，并有著較長(zhǎng)的臨床試驗(yàn)隨訪時(shí)間，這項(xiàng)研究受到臨床觀察的啟發(fā)，并在實(shí)驗(yàn)室測(cè)試了這些假設(shè),最終結(jié)果又對(duì)臨床起到了重要的指導(dǎo)意義。